DNA Fetale Libero Circolante

Il test di ricerca del DNA fetale libero circolante (cff-DNA) può essere utilizzato nella valutazione del rischio di una gravidanza di generare un feto portatore di anomalie cromosomiche, come la trisomia 21 (sindrome di Down), la trisomia 18 (sindrome di Edwards), o la trisomia 13 (sindrome di Patau). Possono, inoltre, essere identificate altre patologie causate dalla presenza di cromosomi soprannumerari (cambiamenti nel numero di cromosomi X o Y presenti). Alcuni laboratori offrono anche lo screening per una serie di patologie causate dalla mancanza di alcune porzioni cromosomiche, chiamate sindromi da microdelezione. 

Occorre discutere con il proprio medico in merito al tipo di test al quale sottoporsi; è consigliabile effettuare una consulenza genetica per stabilire la necessità di un test di screening prenatale piuttosto che di un test diagnostico.

Il test cff-DNA può essere prescritto durante o dopo la decima settimana di gravidanza. I campioni prelevati prima di questo termine sono rifiutati automaticamente.

I risultati sono riportati come "basso rischio" (negativi) o "alto rischio" (positivi).

Se il test cff-DNA risulta negativo o a basso rischio, allora è altamente improbabile che sia presente una trisomia 13, 18 o 21. Se il laboratorio effettua anche la ricerca di altre anomalie cromosomiche (cromosomi sessuali soprannumerari o microdelezioni), allora è improbabile che tali anomalie siano presenti.

È importante ricordare che il test cff-DNA è un test di screening e non diagnostico; pertanto, è possibile che sia presente un'anomalia cromosomica anche se il test risulta a basso rischio (risultato falsamente negativo). Inoltre, questo test non è in grado di identificare ed escludere tutte le anomalie cromosomiche o difetti genetici.

Nel caso in cui il test cff-DNA sia positivo o a rischio alto/aumentato, allora il feto ha un maggiore rischio di presentare quelle anomalie cromosomiche. È importante notare che mentre questo test è in grado di identificare correttamente l'aumentato rischio di sviluppare la Sindrome di Down, non risulta altrettanto accurato con le anomalie a carico di altri cromosomi, inclusi il 18, il 13 e l'X. Il test cff-DNA è un test di screening e non diagnostico; pertanto, è possibile che sia assente un'anomalia cromosomica anche se il test risulta positivo (risultato falsamente positivo).

Per la conferma o l’esclusione di anomalie cromosomiche è necessario sottoporsi a procedure maggiormente invasive, come l’analisi dei villi coriali, tramite il prelievo di un campione di tessuto della placenta, eseguibile tra la 10-ma e la 13-esima settimana di gestazione, o l’amniocentesi, tramite analisi del liquido amniotico, eseguibile tra la 14-esima e la 18-esima settimana. L'analisi del cariotipo (o microarray) viene eseguito per confermare o escludere una sospetta alterazione cromosomica.

Talvolta, il risultato riportato sul referto può essere "indeterminato", se la quantità di cff-DNA presente nel campione di sangue della gestante è insufficiente per la rilevazione. Esistono vari fattori che possono interferire con il test, quali l'età ed il peso corporeo della gestante, o la presenza di più feti (gemelli). In caso di obesità, è possibile sottoporsi ad altri screening prenatali, i cui risultati sono meno influenzati da questo fattore. 

Il risultato del referto dovrebbe essere valutato e discusso da un consulente genetico.

Il risultato del test viene reso disponibile in tempi che dipendono dal laboratorio che esegue il test.

Il test del DNA fetale libero circolante è solo uno dei test di screening prenatale per rilevare la presenza di alterazioni cromosomiche e non viene richiesto routinariamente durante la gravidanza. Le coppie interessate a sottoporsi a questo test dovrebbero discutere con il medico in merito alle varie opzioni disponibili, così da operare una scelta consapevole. Può, inoltre, essere consigliato di rivolgersi ad un consulente genetico per capire i benefici e i rischi del test di screening e la differenza tra risultato positivo e negativo.

Altre opzioni includono:

• indagini su sangue materno del primo trimestre, includono un'ecografia per misurare la traslucenza nucale, ovvero l'accumulo sottocutaneo di liquido dietro il collo fetale, oltre a test su sangue per misurare la proteina A plasmatica associata alla gravidanza (PAPP-A) e la gonadotropina corionica umana (hCG).
• Indagini su sangue materno del secondo trimestre, includono la misura dell'alfa feto proteina (AFP), della gonadotropina corionica (hCG) e dell'estriolo non coniugato (triplo-test); quadruplo-test se si aggiunge l'esame dell'inibina A.
• Indagine integrata del sangue materno: combina le indagini di screening del primo e del secondo trimestre.

Se uno di questi test di screening risulta positivo per un aumentato rischio che il feto sia affetto da un disturbo cromosomico, si raccomanda di eseguire un test diagnostico mediante prelievo dei villi coriali o amniocentesi. Non viene raccomandato di eseguire più test di screening; pertanto, quando i risultati di questi test non rientrano nella norma, occorre effettuare test diagnostici prenatali piuttosto che un test del cff-DNA. 

Occorre discutere con il proprio medico in merito al tipo di test al quale sottoporsi. É consigliabile rivolgersi ad un consulente genetico in seguito alla positività di un test di screening prenatale o di test diagnostico.

Nel caso in cui il test sia stato eseguito durante una gravidanza, anche se negativo, deve essere ripetuto anche nelle gravidanze successive. Infatti, poiché il test valuta il DNA fetale libero circolante rilasciato dal feto, ogni gravidanza deve essere valutata separatamente. 

No, questo test non è in grado di rilevare difetti del tubo neurale o della parete addominale. Lo screening di queste patologie può essere effettuato tramite ecografia nel secondo trimestre di gravidanza, così come tramite il test dell'alfa-fetoproteina (AFP), una proteina prodotta dai tessuti fetali anch'essa misurata nel corso del secondo trimestre di gravidanza. Per maggiori informazioni a riguardo, consultare l'articolo Screening del Secondo Trimestre di Gravidanza.

Si, è un’informazione rilevabile e che può essere richiesta al clinico.  Molti laboratori offrono routinariamente lo screening di cinque cromosomi: 21, 18, 13, X e Y. In tal caso, il test del cff-DNA rileva il sesso del nascituro. Nel caso in cui i genitori non vogliano conoscere il sesso del bambino possono richiedere che questa informazione venga eliminata dal referto.

Lewis, R. (2014 February 27). Noninvasive Prenatal DNA Test Okay for Low-Risk Pregnancies. Medscape Medical News [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/821213. Accessed March 2014.

Lewis, R. (2014 March 8). Fetal DNA Testing for Low-Risk Women Gets Mixed Reviews. Medscape Medical News [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/821690. Accessed March 2014.

(2014 March). Non-invasive Prenatal Testing for Chromosomal Abnormality using Maternal Plasma DNA. Royal College of Obstetricians and Gynaecologists Scientific Impact Paper No. 15 [On-line information]. Available online at http://www.rcog.org.uk/files/rcog-corp/SIP_15_04032014.pdf. Accessed March 2014.

(2014 March 5). SMFM Physicians Recommend NIPT for High-Risk Patients. Smfm Newsroom [On-line information]. Available online at http://www.smfmnewsroom.org/2014/03/smfm-physicians-recommend-nipt-for-high-risk-patients/. Accessed March 2014.

Bianchi, D. et. al. (2014 February 27). DNA Sequencing versus Standard Prenatal Aneuploidy Screening. N Engl J Med 2014; 370:799-808 Preview [On-line information]. Available online at http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa1311037. Accessed March 2014.

(2012 August 28). Fetal fraction of cfDNA does not vary significantly among pregnant women regardless of trisomy risk. News Medical [On-line information]. Available online through http://www.news-medical.net. Accessed March 2014.

Barclay, L. (2013 June 7). Maternal Blood Test May Detect Trisomy in First Trimester‏. Medscape Medical News [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/805519. Accessed March 2014.

(2012 October 3). Cell-Free DNA Test Highly Accurate as Prenatal Screen. Medscape Multispecialty from Reuters Health Information [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/771926. Accessed March 2014.

Laura A. Stokowski, L. and Klugman, S. (2013 November 7). The Pros and Cons of Noninvasive Prenatal Screening. Medscape Multispecialty [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/813882. Accessed March 2014.

Walsh, J. (2012 June 20). Fetal Aneuploidy Detection by Maternal Plasma DNA Sequencing. Medscape Multispecialty from CTAF [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/773416. Accessed March 2014.

(Reviewed 2013 July). Prenatal Tests. March of Dimes [On-line information]. Available online at http://www.marchofdimes.com/pregnancy/prenatal-tests.aspx#. Accessed March 2014.

Brock, J. and Langlois, S. (2013 February). Detection of Down Syndrome, Trisomy 18, and Trisomy 13 Using Cell-Free DNA in Maternal Plasma. SOGC Clinical Practice Guidelines [On-line information]. Available online through http://sogc.org. Accessed March 2014.

Lynch, E. and Dezen, T. (2012 December 12). The Leading Edge Of Medical Innovation: New Prenatal Genetic Tests Use Mom's Blood to Learn about Her Baby. March of Dimes [On-line information]. Available online through http://www.marchofdimes.com. Accessed March 2014.

(Reviewed 2013 November). Trisomy 13. Genetics Home Reference [On-line information]. Available online at http://ghr.nlm.nih.gov/condition/trisomy-13. Accessed April 2014.

Elshimali, Y. et. al. (2013 September 13). The Clinical Utilization of Circulating Cell Free DNA (CCFDNA) in Blood of Cancer Patients. Int J Mol Sci. Sep 2013; 14(9): 18925–18958. [On-line information]. Available online at http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3794814/. Accessed April 2014.

(December 2012) The American College of Obstetricians and Gynecologists Committee on Genetics, The Society for Maternal-Fetal Medicine Publications Committee, Noninvasive Prenatal Testing for Fetal Aneuploidy. Available online through http://www.acog.org. Accessed May 2014.

Gregg AR, Skotko, BG, Bekendorf JL, et al. Noninvasive Prenatal Screening for Fetal Aneuploidy, 2016 Update: A Position Statement of the American College of Medical Genetics and Genomics. Genetics In Medicine. Published online 28 July 2016. Available online at http://www.nature.com/gim/journal/vaop/ncurrent/full/gim201697a.html. Accessed January 10, 2017.

Genetic Support Foundation. Cell-free DNA (cfDNA) Screening. Available online at https://www.geneticsupportfoundation.org/genetics-and-you/pregnancy-and-genetics/pregnancy-and-genetics-tests/cell-free-dna-cfdna. Accessed January 2017.

(September 2016) American College of Obstetricians and Gynecologists. Prenatal Genetic Screening Tests. Available online at http://www.acog.org/Patients/FAQs/Prenatal-Genetic-Screening-Tests?IsMobileSet=false. Accessed January 2017.

(©2017) Cell-Free DNA Prenatal Screen. Mayo Medical Laboratories. Available online at http://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Specimen/63439. Accessed January 2017.

(September 2015) American College of Obstetricians and Gynecologists. Committee on Genetics Society for Maternal–Fetal Medicine, Committee Opinion No. 640. Available online at http://www.acog.org/Resources-And-Publications/Committee-Opinions/Committee-on-Genetics/Cell-free-DNA-Screening-for-Fetal-Aneuploidy. Accessed January 2017.

(September 2016) Prenatal Genetic Screening Tests. American Congress of Obstetricians and Gynecologists. Available online at http://www.acog.org/Patients/FAQs/Prenatal-Genetic-Screening-Tests?IsMobileSet=false. Accessed January 2017.

Interview with Alan H.B. Wu, PhD. Director, Clinical Chemistry, Hartford Hospital, Hartford, CT.

First Blood Test for Congestive Heart Failure Wins FDA Clearance. Clinical Laboratory Strategies, December 2000, Vol. 5, No. 12, Pg.1.

Thomas, Clayton L., Editor (1997). Taber's Cyclopedic Medical Dictionary. F.A. Davis Company, Philadelphia, PA [18th Edition].

Pagana, Kathleen D. & Pagana, Timothy J. (2001). Mosby's Diagnostic and Laboratory Test Reference 5th Edition: Mosby, Inc., Saint Louis, MO.

Tang, W. (2004 February 27). NACB: Recommendations for the use of Cardiac Biomarkers in Heart Failure. NACB: Recommendations for the use of Cardiac Biomarkers in Heart Failure – Chapter 2 [Draft Guidelines]. Available online at http://www.nacb.org/lmpg/biomark/card_biomarkers_chp2.doc.

Bay, M. et. al. (2003). NT-proBNP: a new diagnostic screening tool to differentiate between patients with normal and reduced left ventricular systolic function. Heart ONLINE Heart 2003;89:150-154 [On-line journal]. Available online at http://heart.bmjjournals.com/cgi/content/full/89/2/150.

Diagnostic Products Corporation Acquires Nonexclusive Rights to a Key Cardiac Marker, NT-proBNP, from Roche Diagnostics—Agreement widens access to unique marker for heart failure and allows for better/earlier/improved therapy. (2004 February 11) DPC [On-line press release]. Available online at http://www.dpcweb.com/newsreleases/2004/february/ntprobnp.htm.

Roche Receives FDA Clearance for Elecsys proBNP Assay – First Automated Blood Test to Aid in the Diagnosis of Congestive Heart Failure (2002). Roche Diagnostics [On-line press release]. Available online at http://www.roche-diagnostics.com/press_lounge/press_releases/archive/2002_11_20.html.

Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, eds. St. Louis: Elsevier Saunders; 2006 Pp. 1630-1631.

Clarke, W. and Dufour, D. R., Editors (2006). Contemporary Practice in Clinical Chemistry. AACC Press, Washington, DC; Pg. 264.

deFilippi C. Natriuretic Peptides for Diagnosing Heart Failure and Beyond: What We Know in 2007. (May 24, 2007) Medscape Today. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/557030. Accessed September 2008.

Maher KO et al. B-type natriuretic peptide in the emergency diagnosis of critical heart disease in children. Pediatrics 2008 Jun; 121:e1484. Available online at http://pediatrics.aappublications.org/cgi/content/full/121/6/e1484?linkType=FULL&journalCode=pediatrics&resid=121/6/e1484. Accessed September 2008.

(Updated 2010 January 1). What is Heart Failure? National Heart Lung and Blood Institute [On-line information]. Available online at http://www.nhlbi.nih.gov/health/health-topics/topics/hf/. Accessed November 2011.

Lehman, C. et. al. (Revised 2011 March). Heart Failure. ARUP Consult [On-line information]. Available online at http://www.arupconsult.com/Topics/HeartFailure.html?client_ID=LTD. Accessed November 2011.

(© 1995-2011). Test ID: BNP83873 B-Type Natriuretic Peptide (BNP), Plasma. Mayo Clinic Mayo Medical Laboratories [On-line information]. Available online at http://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Overview/83873. Accessed November 2011.

(© 1995-2011). Test ID: PBNP84291 NT-Pro B-Type Natriuretic Peptide (BNP), Serum. Mayo Clinic Mayo Medical Laboratories [On-line information]. Available online at http://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Overview/84291. Accessed November 2011.

Malcolm, J. and Arnold, O. (Revised 2010 January) Heart Failure (HF) (Congestive Heart Failure). Merck Manual for Healthcare Professionals. [On-line information]. Available online at http://www.merckmanuals.com/professional/cardiovascular_disorders/heart_failure/heart_failure_hf.html?qt=BNP&alt=sh. Accessed November 2011.

Pagana, K. D. & Pagana, T. J. (© 2011). Mosby's Diagnostic and Laboratory Test Reference 10th Edition: Mosby, Inc., Saint Louis, MO. Pp 690-692.

Reviewer May 2015: Thomas Kampfrath, PhD, DABCC.

Lüers C, Schmidt A, Wachter R, Fritzsche F, Sutcliffe A, Kleta S, Zapf A, Hagenah G, Binder L, Maisch B, Pieske B. Serial NT-proBNP measurements for risk stratification of patients with decompensated heart failure. Herz. 2010 Oct;35(7):488-95.

William Clarke. Contemporary Practice in Clinical Chemistry, 2nd Edition Paperback – February 4, 2011. ISBN-13: 978-1594251023.

Michael L. Bishop, Edward P. Fody, Larry E. Schoeff. Clinical Chemistry: Principles, Techniques, and Correlations, 2013. 7th edition.

Kaplan & Pesce. Clinical Chemistry, 5th Edition. Theory, Analysis, Correlation. 2009.

(March 27, 2014) National Heart, Lung, Blood Institute. Who is at Risk of Heart Failure? Available online at http://www.nhlbi.nih.gov/health/health-topics/topics/hf/atrisk. Accessed May 2015.