STEC

Il campione di feci liquide o non strutturate, viene raccolto in un contenitore asciutto e pulito. Questo non deve essere contaminato con acqua o urine. Una volta effettuata la raccolta, il campione deve essere mantenuto refrigerato e consegnato al laboratorio il prima possibile.(preferibilmente entro 2 ore dall’emissione, o entro 24 ore se conservate a 4°C). Alcuni laboratori forniscono uno specifico dispositivo contenente un tampone contenente un conservante per conservare meglio il campione dal momento della raccolta fino alla consegna al laboratorio. Il tempo della raccolta è molto importante poiché lo STEC è difficilmente rilevabile nelle feci prodotte dopo una settimana dalla comparsa dei sintomi.

Questi test vengono utilizzati per rilevare la presenza di Escherichia coli produttore di tossina Shiga (STEC) e come supporto alla diagnosi dell’infezione del tratto gastrointestinale ad opera di questi batteri. Il batterio E. coli fa normalmente parte del microbiota intestinale degli esseri umani e di altri mammiferi ma esistono dei ceppi di E. coli in grado di produrre una tossina chiamata Shiga. Oltre ad una grave diarrea, la tossina Shiga può causare la Sindrome Emolitico Uremica (SEU), una patologia seria che può portare ad insufficienza renale fino a morte, se non trattata in maniera adeguata. I test di ricerca di STEC sono un utile supporto alla diagnosi e al trattamento di queste patologie.

Questi test possono essere utilizzati anche per la rilevazione di possibili epidemie di STEC. Questo tipo di infezioni sono spesso associate al consumo di acqua o cibo contaminati, al contatto con animali da fattoria o con il loro ambiente e sono trasmissibili da persona a persona. Il ceppo più comunemente associato a questo tipo di patologia è il sierotipo O157:H7; tuttavia ,esistono dei sierotipi non-O157 (ad esempio O104:H4) che possono essere responsabili degli stessi segni e sintomi quali la diarrea grave e la SEU.

La diagnosi precoce di questo tipo di infezione è di primaria importanza per la prevenzione della diffusione del patogeno alla comunità e per prevenire, se necessario, la SEU. I test per la ricerca di STEC includono:

Test molecolari: la PCR per il gene codificante per la tossina Shiga 1 (stx1) o 2 (stx2) è un test rapido che può essere utilizzato per la conferma della presenza di STEC.

Coprocoltura: la coltura del campione di feci viene effettuata utilizzando uno specifico terreno di coltura che permette la crescita del patogeno STEC O157 inibendo contemporaneamente la crescita dei batteri che fanno normalmente parte della flora batterica intestinale. Una volta che il batterio è cresciuto in coltura, vengono effettuati ulteriori test con lo scopo di identificarlo.

Generalmente prima della semina su terreno differenziale i campioni vengono incubati in
brodo di arricchimento.

Il campione di feci può essere utilizzato anche per effettuare le colture di altri microrganismi patogeni, come Salmonella, Shigella e Campylobacter. Il sierotipo STEC O157:H7 può essere distinto in coltura rispetto ad altri patogeni e rispetto ad altri ceppi di E. coli grazie alle peculiari caratteristiche che vengono messe in evidenza dalla crescita in specifici mezzi di coltura. I ceppi non-O157 invece non possono essere rilevati tramite l’esame colturale standard ma necessitano di test particolari. Le raccomandazioni internazionali sottolineano l’importanza di effettuare l’esame colturale delle feci a tutti i soggetti con una diarrea acuta di sospetta origine epidemica.

Test immunoenzimatico (EIA): questo tipo di test viene utilizzato per rilevare la presenza della tossina Shiga. La coprocoltura permette l’identificazione dello STEC O157 ma non di quelli non-O157. Pertanto, viene raccomandato l’utilizzo del test EIA per la rilevazione della tossina Shiga in associazione all’esame colturale. Il test EIA permette la rilevazione della tossina ma non permette la distinzione dei sierotipi di E. coli producenti Shiga. Questi saggi presentano però una bassa sensibilità e pertanto vengono raramente utilizzati nei laboratori di microbiologia.

Test molecolari: la PCR per il gene codificante per la tossina Shiga 1 (stx1) o 2 (stx2) è
un test rapido che può essere utilizzato per la conferma della presenza di STEC. In molti
laboratori il test molecolare viene utilizzato come screening e precede l’esame colturale
che viene eseguito in caso di positività del campione per la presenza del gene codificante
la tossina. Questi test sono molto sensibili e permettono diagnosi rapide consentendo di
selezionare la terapia adeguata in tempi più rapidi.

Test sierologici: I test sierologici sono ampiamente utilizzati ultimamente per le infezioni
da STEC, soprattutto quando manca l’isolamento batterico. L’esame ricerca l’anticorpo
sierico anti-STEC LPS, che può persistere per diverse settimane nel torrente circolatorio

Questo test può essere richiesto nel caso in cui il clinico sospetti un’infezione di E. coli producente la tossina Shiga in un paziente con forte diarrea.

I segni e sintomi includono:

• Diarrea grave e acuta che persiste per più di qualche giorno
• Sangue nelle feci
• Febbre
• Forte dolore addominale, crampi e/o gonfiore
• Nausea e Vomito

Questi test possono essere richiesti anche nel caso in cui si sospetti un’epidemia di E. coli; per esempio, nel caso in cui un gruppo di persone che abbiano mangiato cibo proveniente dalla stessa fonte, sviluppino gli stessi segni e sintomi.

Coprocoltura

Un risultato negativo per la ricerca di Escherichia coli producente la tossina Shiga (STEC) indica che il sierotipo E. coli O157:H7 non è presente o è presente in quantità troppo piccole per essere rilevato. Pertanto, i sintomi possono essere causati da un altro agente patogeno, come Salmonella, Shigella, Campylobacter, altri patogeni virali o parassiti. Un test colturale positivo indica la presenza di E. coli producente la tossina Shiga, verosimilmente il sierotipo O157:H7. In seguito alla crescita su piastra selettiva viene effettuata l’identificazione di specie, per confermare la presenza di STEC ed i test di sensibilità agli antibiotici per stabilire le molecole attive contro questo patogeno.

Test immunoenzimatico per la rilevazione della tossina Shiga

Un risultato negativo per il test immunoenzimatico (EIA) per la tossina Shiga indica che tale tossina non è presente.

Un risultato positivo suggerisce invece la presenza della tossina nelle feci; per identificare il sierotipo di E. coli responsabile sono necessari ulteriori test.

Il batterio E. coli non patogeno è normalmente parte della flora batterica intestinale di soggetti sani. Tuttavia, l’infezione di questo batterio in sedi non intestinali può comportare la comparsa di malattie serie. E. coli è responsabile della maggior parte delle infezioni delle vie urinarie e può anche causare anche infezioni invasive. L’identificazione di E. coli come agente responsabile dell’infezione viene effettuata tramite esami colturali utilizzando campioni prelevati dalla sede dell’infezione.

Nel caso di infezioni del sierotipo O157 nelle quali la malattia non abbia progredito verso la Sindrome Emolitico Uremica (SEU) si raccomanda una terapia di supporto caratterizzata da riposo e idratazione. Le persone maggiormente a rischio di sviluppare SEU, come i bambini e gli anziani, devono essere continuamente monitorati. Nel caso in cui l’infezione progredisca verso la SEU, è necessario un immediato ricovero ospedaliero.

L’utilizzo di farmaci antidiarroici è sconsigliato e talvolta associato ad un prolungamento
dell’infezione soprattutto in pazienti con maggiore rischio di SEU, è necessario pertanto il
consenso del medico curante.

Le infezioni dei sierotipi non-O157 in genere vengono trattati con riposo e idratazione e spesso si risolvono senza nessun altro tipo di intervento.

In corso di infezione di E. coli producente la tossina Shiga, l’utilizzo di antibiotici aumenta il rischio di sviluppare la Sindrome Emolitico Uremica ed alcune classi di antibiotici sembrano
associate ad un incremento nella produzione della tossina Shiga.

I farmaci anti-diarroici possono prolungare la malattia perché l’inibizione della peristalsi intestinale diminuisce la velocità di eliminazione del batterio dal tratto gastrointestinale.

Esistono altri batteri che possono causare diarrea acuta i più comuni dei quali:

• Salmonella, spesso presente in uova crude, pollame crudo e nei rettili da compagnia
• Shigella, presente in acqua e cibo contaminato da feci
• Campylobacter, presente in pollame crudo o cotto poco
• Clostridium difficile, può popolare l’intestino dopo l’uso di antibiotici
• Clostridium perfringens, una delle principali cause di malattie di origine alimentare, collocandosi ai primi posti quale causa di tossinfezioni alimentare
• Yersinia enterocolitica, responsabile di epidemie causate dalla contaminazione di molteplici prodotti alimentari, tra cui latticini, carne, pollame, frutta, verdura
• Bacillus cereus, responsabile di intossicazione alimentare a causa dell’ingestione dell’enterotossina cereulide, presente negli alimenti contaminati (cereali, specialmente riso, latticini, carne, vegetali, alimenti essiccati)

Anche i parassiti possono causare la diarrea. Si trovano nei laghi e nei corsi d’acqua in giro per il mondo e possono anche contaminare le piscine, le vasche idromassaggio e gli impianti idrici pubblici.

Nei bambini la causa più frequente di diarrea grave è rappresentata dal Rotavirus. Altri virus responsabili della diarrea includono gli Adenovirus fecali, il virus Norwalk e i virus Norwalk-like, i Calicivirus, gli Astrovirus, i Coronavirus e, sia pure con dovute riserve, gli Enterovirus.

Test

Coprocoltura

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Registro italiano della Sindrome Emolitica Uremica ESCHERICHIA COLI O157 E ALTRI
VTEC: QUADRO EPIDEMIOLOGICO E INDICAZIONI OPERATIVE PER L’AUTORITÀ
COMPETENTE PER LA SICUREZZA ALIMENTARE
www.ceirsa.org/fd.php?path=201603/E_COLI_VTEC.pdf

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