TCR Riarrangiamento genico

Il test per la rilevazione dei riarrangiamenti del TCR viene utilizzato come sostegno alla diagnosi di linfoma a cellule-T e per la valutazione della malattia residua e dell’eventuale ricaduta successiva alla terapia.

Il linfoma si sviluppa al momento in cui una cellula-T anomala comincia a crescere e riprodursi producendo un gran numero di cellule identiche (cloni). I cloni crescono e si dividono in maniera incontrollata, spiazzando le cellule normali. Esistono molti tipi diversi di linfoma a cellule-T, ciascuno con una diversa prognosi e caratteristiche peculiari, come la capacità di risposta alla terapia. Esistono diversi sistemi di classificazione che li descrivono, il più recente dei quali è quello fornito dall’Organizzazione Mondiale della Sanità (The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms).

Il test si avvale di più fasi e prevede l’esecuzione di esami aggiuntivi:

Emocromo e conta differenziale dei globuli bianchi: per valutare il numero, il tipo e la maturità dei leucociti presenti nel circolo ematico. Il risultato può rilevare un aumento del numero di linfociti e/o la presenza di linfociti anomali.

Valutazione anatomo-patologica dello striscio di sangue o di midollo osseo, dei linfonodi, della pelle e/o di altri tessuti bioptici. Il campione deve essere analizzato al microscopio da personale specializzato.

Se indicato, l’immunofenotipo eseguito sul campione di sangue, di midollo osseo o su altri tessuti (come linfonodi) tramite metodiche di citometria o immunochimica. Questi test rilevano la presenza o l’assenza di marcatori specifici esposti sulla superficie delle cellule o posti al loro interno. Questi marcatori in genere vengono indicati con le lettere CD (Cluster of Differentiation) seguite da un numero. Il pattern antigenico (la presenza o l’assenza di specifici marcatori) può fornire informazioni utili riguardo la monoclonalità delle cellule-T e ad ulteriori classificazioni per l’identificazione del tipo di linfoma a cellule-T.

La cellula-T proliferante può essere benigna o maligna. Nel caso in cui, dopo aver eseguito tutti i test sopracitati, non sia stato possibile fare ancora una diagnosi definitiva, può essere effettuato il test del riarrangiamento genico del TCR.

Talvolta questo test viene effettuato per la valutazione dell’efficacia della terapia, per rilevare la malattia residua minima o la ricaduta della malattia evidenziate dalla presenza di cellule-T monoclonali anomale.

Il test viene effettuato nel caso in cui un paziente presenti segni e sintomi indicativi per la presenza di un linfoma, come:

 Uno o più linfonodi gonfi ma non doloranti – in base alla sede del linfonodo interessato, i sintomi possono includere l’area del petto, ascelle, collo, addome o inguine.

• Lesioni della pelle
• Fegato e/o milza ingrossati
• Senso di fatica
• Febbre
• Sudorazione notturna
• Inspiegabile perdita di peso
• Sintomi neurologici che possono suggerire l’interessamento del sistema nervoso centrale

L’alterazione dei parametri rilevabili all’emocromo o tramite la conta differenziale dei leucociti può essere il primo segnale della presenza del linfoma in una persona asintomatica o con sintomi lievi e aspecifici.

Il test può essere eseguito nel caso in cui altri test di laboratorio forniscano indicazioni riguardo la presenza del linfoma e/o anche quando questi non forniscano risultati conclusivi. Alcuni esempi includono:

• Incremento del numero dei linfociti, in particolare in presenza di linfociti anomali rilevabili tramite l’emocromo o lo striscio di sangue periferico
• Segni della presenza di un linfoma su un tessuto bioptico, un campione di fluidi corporei o di midollo osseo
• Presenza di specifici assetti antigenici delle cellule-T rilevabili tramite l’immunofenotipo (citometria o immunochimica) che possono essere non definitivi per la diagnosi di linfoma o per i quali il clinico voglia una conferma

Il test può inoltre essere richiesto per la valutazione dell’efficacia della terapia e/o per la rilevazione della malattia residua minima o dell’eventuale ricaduta in una persona trattata per un linfoma.

L’interpretazione dei risultati del test richiede personale specializzato in malattie ematologiche. I risultati devono essere valutati in accordo con le informazioni cliniche e con i risultati di altri test come l’istopatologia, l’immunofenotipo tenendo conto della forza e dei limiti delle diverse metodiche e dei possibili risultati osservabili compatibili con un assetto normale.

Questo test aiuta a confermare la presenza di una popolazione clonale e quindi è un sostegno alla formulazione della diagnosi definitiva di linfoma. In generale, se più test sono concordi nel rilevare una popolazione clonale di cellule-T è altamente probabile che il paziente sia affetto da linfoma a cellule-T o che vi sia una ricaduta.

Esempi di linfoma rilevabili tramite questo test includono:

• Leucemia/linfoma a cellule-T dell’adulto
• Linfoma anaplastico a grandi cellule
• Linfoma angioimmunoblastico a cellule-T
• Linfoma a cellule-T associato ad enteropatia
• Linfoma a cellule-T epatosplenico
• Micosi fungoide
• Linfoma periferico a cellule-T non specificato
• Leucemia/linfoma linfoblastico a cellule-T
• Sindrome di Sézary
• Leucemia linfocitica granulare a grandi cellule-T
• Leucemia prolinfocitica a cellule-T

Secondo i dati del registro italiano tumori, il linfoma non-Hodgkin è il linfoma più frequentemente diagnosticato e, nel periodo 1998-2002 in Italia, i linfomi non-Hodgkin hanno rappresentato il 2.9% di tutti i tumori diagnosticati tra gli uomini e il 3.2% tra le donne, con circa 5000 nuovi casi diagnosticati ogni anno.

Il test può richiedere la ripetizione nel caso in cui nel campione non vi sia quantità sufficiente di DNA per l’esecuzione del test.

La rilevazione della presenza di riarrangiamenti genici del TCR clonali non è necessariamente indice della presenza di un linfoma a cellule-T. Una persona può avere una popolazione clonale di cellule-T pur non avendo un tumore. Piccoli cloni di cellule-T sono spesso associati alla presenza di patologie automimmuni, alcune infezioni, immunosoppressione o attivazione del sistema immunitario. Ciò significa che in una persona non affetta da tumore possono essere presenti anche uno o più gruppi di cloni di cellule-T.

La negatività al test del riarrangiamento del TCR non esclude la presenza di linfoma. Il metodo usato potrebbe non essere abbastanza sensibile per rilevare la presenza di riarrangiamenti clonali o i linfociti tumorali potrebbero presentare mutazioni non rilevabili dal test o ancora il linfoma potrebbe essere un linfoma a cellule-B. 

Vista la possibile presenza di risultati falsamente positivi o falsamente negativi, l’interpretazione del test richiede una visione completa del quadro clinico e dei risultati di altri test.

No. Questo test viene richiesto solo nel caso in cui le analisi di routine non siano in grado di fornire una diagnosi conclusiva.

No. La positività al test conferma solo la diagnosi di linfoma a cellule-T. La progressione e la risposta al trattamento del tumore dipende dal tipo di tumore diagnosticato e da caratteristiche soggettive del paziente.

Il test deve essere effettuato presso laboratori dotati di strumentazioni specifiche e personale specializzato nell’esecuzione e nell’interpretazione del test.

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